Sono stati incaricati di raccogliere il campione prima di mangiare o bere. Inoltre è stato detto loro di sciacquare abbondantemente con acqua di rubinetto, ma senza lavarsi i denti prima di
prelevare il campione di saliva, al fine di evitare la contaminazione della saliva con sangue da possibili microiniezioni nella cavità orale. I campioni sono stati quindi raccolti e congelati a -20 ° C
nel frigorifero del laboratorio, fino al dosaggio.
La concentrazione di cortisolo(SC) è stata determinata mediante saggio di immunoassorbimento enzimatico (ELISA), con un limite inferiore di sensibilità di 0,0537 μg / dl e coefficienti medi intra e inter-assay di variazioni rispettivamente del 2,61% e del 7,47%.